用18s rRNA做RT-PCR的内参时,可以用oligo dT做反转录吗?

用18s rRNA做RT-PCR的内参时,可以用oligo dT做反转录吗? rp49基因是什么基因,很多做半定量PCR的用这个基因做内参,想了解下该基因是否是rRNA 我准备做定量PCR,需要检测的基因大约有10个左右,请问我需要多少个内参基因?只用1个内参行不行?我们实验室经常用18S和β-actin两个内参,是不是内参越多越好?怎样去选择最合适的内参基因呢 请问,GAPDH作为RT-PCR内参的原理是什么呀?我知道为什用它做内参了,就是不清楚怎么用它, 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊? 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 反转录RT-PCR的内参如何选择? 求助水稻的actin 内参基因引物想用水稻的内参做荧光定量PCR,有哪位大侠有水稻内参Actin的引物么?在下感激不尽! 做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因? 怎样摸索PCR条件我做的 RT-PCR 以内参为对照进行条件摸索 但是就是P出不来条带 RT-PCR电泳照片做RT-PCR跑电泳时,只在一个孔中单独加了内参,其他孔中分别加了marker和目的基因,这样的照片发表文章时行吗?看其他人的电泳照片内参的亮度都是一样的,我就只单独加了一个内 RT-PCR中内参蛋白GAPDH和b-actin人和小鼠的可以用同一对引物吗?最近在做RT-PCR实验,所用细胞有人肿瘤细胞和小鼠巨噬细胞,请问内参蛋白GAPDH和b-actin在这两种细胞中扩增可以选用同一对引物吗? RNA跑胶多长时间才能把28S,18S和5S分开,我跑了大概30分钟,出来的是一条很亮的带,这样的RNA做RT-PCR内参能出结果,但是目的基因表达不出来,是因为RNA污染或降解吗,提取过程中我已经很注意了,以 用RT-PCR检测目的基因的表达情况,需将内参基因的条带亮度调成一致.用RT-PCR检测目的基因的表达情况,需将内参基因的条带亮度调成一致,这个很费事,我一般是配50ul的内参基因pcr反应体系,分几 real-time PCR中内参基因的CT值做了几次real-time PCR ,选的18s做内参基因,是直接购买的,所以没有问题,但是测得的CT值在对照组中和实验组中均有误差,相差约0.3左右,想请问这样的误差正常吗?如果 我做的RT-PCR怎么样让内参一致?刚入门 老板让做内参的条件 反复做也没有要P出来的目的条带 我的退火温度是55 可以的 但是用这个条件去P 其他的样就P不出来 应该怎么办? 我要做CTGF和BMP-7的反转录RT-PCR,引物如何设计?内参怎么选择?GAPDH和b-actin哪个能用? 还想再向您请教下 关于荧光定量PCR 相对定量内参基因的选择,如果我想用18SrRNA,我该怎么得到这个内参呢