蛋白表达时操作方法对结果有影响吗我做的原核表达,试过低温诱导、低浓度IPTG诱导、不同时间诱导、扩大培养加葡萄糖,但是怎么都没有结果,是因为我操作的原因吗?载体说明书上说在超声

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/04 15:18:00
蛋白表达时操作方法对结果有影响吗我做的原核表达,试过低温诱导、低浓度IPTG诱导、不同时间诱导、扩大培养加葡萄糖,但是怎么都没有结果,是因为我操作的原因吗?载体说明书上说在超声

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蛋白表达时操作方法对结果有影响吗
我做的原核表达,试过低温诱导、低浓度IPTG诱导、不同时间诱导、扩大培养加葡萄糖,但是怎么都没有结果,是因为我操作的原因吗?载体说明书上说在超声细胞破碎后要用4℃ 20000g 离心20min,但是我每次都是把它分装到2ml离心管里用小型离心机室温下12000rpm离心 5min……
这会影响结果吗

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您好!没有结果是没有看到表达条带?如果没有表达的话,应该找找你质粒的原因了.一般破碎后使用12000rpm离心 5min没有任何问题,能将上清沉淀充分分离,另你的蛋白在上清沉淀里都找不到?

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蛋白表达时操作方法对结果有影响吗我做的原核表达,试过低温诱导、低浓度IPTG诱导、不同时间诱导、扩大培养加葡萄糖,但是怎么都没有结果,是因为我操作的原因吗?载体说明书上说在超声 乙醇对蛋白的提取有影响吗 对病毒蛋白进行原核表达的研究目的很多论文里面对某个病毒蛋白进行什么“诱导”,“原核表达”是什么意思,“原核表达”的目的是什么,这样做是为了达到哪方面的研究目的, 有谁知道进行蛋白电泳时温度升高对电泳结果有影响吗?是SDS-PAGE 凝胶电泳. 用排水集气法量取气体体积时,集气瓶上方原有的空气对结果有影响吗 测蛋白含量时,是否每次都要做标准曲线?每个人做的标准曲线不一样,是否会对其有影响? 凯氏定氮消化后溶液的颜色为什么是无色我做的是螺旋藻蛋白含量的测定,消化结束后颜色是蓝绿色的,等从消化炉上取下后不一会就变成无色了.是铜离子被氧化了吗,这样的话会对结果有影响 我做电泳时不小心TEMED加多了一倍.请问对实验的结果有影响吗?另外,以前跑电泳都有带,而且非常清晰,这一次居然没有带了,是不是TEMED加多的原因照成的?TEMED,AP究竟是什么?还有其他可能的原 不用IPTG诱导的重组蛋白能在BL21中表达吗,如果表达经SDS-PAGE电泳后能看到条带吗,.我最近在做重组蛋白的表达,我构建好了一个重组载体,启动子是不用IPTG诱导表达的,我跑了两次电泳结果都没 我要研究一个基因的蛋白是否对c-myc的表达是否有影响,如果用白血病细胞,那c-cmyc的表达变化是细胞本身改变引起的还是我这个目的基因起了调控作用? 哪里做蛋白原核表达服务好? 有哪家公司做蛋白原核表达服务? 我做的细胞培养的实验,用免疫组化法检测基因蛋白表达,可以用OD值代表蛋白表达的差异吗 第一天做的胸透,第二天抽血做的染色体检查,会对染色体检查结果有影响吗? 孕妇24小时做尿蛋白检查我怀孕36周检查查出蛋白高,医生叫我做24小时尿蛋白检查,我有一次尿忘了放 在里面了,检查有影响吗第2次的尿忘了放在里面了,要不要再重新做一次24小时尿蛋白检查, 在做转化时,加完LB之后,放摇床里摇2个小时的菌,但是摇床被别人关了,没有摇,会对结果有影响吗? 稀释了对结果会有影响吗?我是做土壤中酶活性的,工程量实在大...想先问清楚 为什么我的目的蛋白表达量很少?严重谢谢.做蛋白表达时目的蛋白表达量很少,因为菌种(转入目的基因的bl21)是在-20度保存了近一年的,且一年前是表达出来的,但现在目的蛋白表达量很少,还