原代肝细胞培养问题最近在分离原代肝细胞,用的是两步灌流法,就是先用灌流液,后用胶原酶灌流消化,然后用200目筛网过滤,50g离心3min,之后用PBS洗3次,也是上面的转速和时间,得到下层的肝细胞

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/05 14:09:57

原代肝细胞培养问题最近在分离原代肝细胞,用的是两步灌流法,就是先用灌流液,后用胶原酶灌流消化,然后用200目筛网过滤,50g离心3min,之后用PBS洗3次,也是上面的转速和时间,得到下层的肝细胞
原代肝细胞培养问题
最近在分离原代肝细胞,用的是两步灌流法,就是先用灌流液,后用胶原酶灌流消化,然后用200目筛网过滤,50g离心3min,之后用PBS洗3次,也是上面的转速和时间,得到下层的肝细胞,用培养液悬浮,接到6孔板里,然后就有浑浊的沉淀,那个沉淀是肝细胞吧?4个小时之后换液,请问这个时候肝细胞是不是已经贴壁了,我看到还是要多沉淀,也不知道是死细胞还是没贴壁的细胞,要多长时间才换液呢?

原代肝细胞培养问题最近在分离原代肝细胞,用的是两步灌流法,就是先用灌流液,后用胶原酶灌流消化,然后用200目筛网过滤,50g离心3min,之后用PBS洗3次,也是上面的转速和时间,得到下层的肝细胞
原代肝细胞很容易贴壁生长,4小时肯定能贴壁.
“然后就有浑浊的沉淀,那个沉淀是肝细胞吧?”将此沉淀用培养液或pbs稀释,加台盘蓝染色,显微镜下观察,若为活细胞,通常就是肝细胞了,要培养好,最好有大于85%以上的活性.
原代肝细胞最好生长在鼠尾胶原上,也就是用鼠尾胶原铺板,然后再普细胞.
4小时后换液,然后每20小时左右换液,通常原代肝细胞难以增值,但是维持20天左右没问题.

原代肝细胞培养问题最近在分离原代肝细胞,用的是两步灌流法,就是先用灌流液,后用胶原酶灌流消化,然后用200目筛网过滤,50g离心3min,之后用PBS洗3次,也是上面的转速和时间,得到下层的肝细胞大鼠原代肝细胞在高糖DMEM培养液中培养能否合成肝糖原? 我要做小鼠肝细胞的原代培养,不知道采取哪种肝细胞分离方法好,希望给点建议, 求鼠肝细胞原代培养基成分要做鼠肝细胞原代培养,想用DMEM培养基,不知道是用高糖、低糖、还是无糖的,培养基中还要加哪些成分?希望有成功培养经验的大侠指导. 请问在原代培养和传代培养中的“代”具体指的的是什么? 请问在原代培养和传代培养中的“代”具体指的的是什么? 下面关于原代培养的说法,不正确的是A原代培养的细胞分化程度低B原代培养的细胞在培养过程中进行贴壁生长C原代培养的细胞传到10代部分细胞已衰老死亡D原代培养的细胞传到50代细胞的遗如何进行细胞原代培养? 细胞原代培养的意义原代培养的基本操作流程肝癌细胞原代培养困难吗? 简述细胞原代培养的过程. 哪可以代做小鼠肺泡巨噬细胞原代培养? 如何分离原代肿瘤细胞原代培养的细胞每代(包括原代)都需要冻存吗? 谁能说一下原代培养和传代培养的区别原代培养细胞为什么要无菌培养为什么原代培养和传代培养都要用胰液消化