作业帮含有抗生素的培养基如何灭菌?抗生素高温会失活 急·····
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/03 20:52:21
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琼脂稀释法配制带药平板
如果是测试微生物的耐药性,可按以下步骤配制,如果只是用于筛选某些菌,只要配制好抗生素母液按照步骤（3）操作即可.
（1）抗生素药物溶液：按产品说明书配制各种抗生素药物原液,浓度应不低于1000μg/ml或10倍于最高测试浓度,除非药物的溶解度有影响.将原液对倍稀释形成浓度梯度,与培养基混合后的最终浓度可依次为512μg/ml,256μg/ml；128μg/ml；64μg/ml；32μg/ml；16μg/ml；8μg/ml；4μg/ml；2μg/ml；1μg/ml；0.5μg/ml；0.25μg/ml和0.125μg/ml.按实验室的具体需求选用适当的药物浓度范围.抗生素药物原液应贮存在-60℃或更低温度,保存期不超过6个月,期间需用标准质控菌株检测其效价.
（2）培养基：M-H 琼脂为常规细菌药敏试验的最佳培养基,其pH应为7.7.4,用于葡萄球菌属对甲氧西林、苯唑西林和萘夫西林的耐药性检测则需添加2%NaCl.
（3）配制带药培养基：配制时加水量应减少1/10,以备添加稀释好的抗生素溶液.灭菌后水浴冷却至48~50℃,逐个将各个浓度的抗生素溶液以1：10加入M-H琼脂中,充分混匀,倾注平板,配制完成后于0～4℃保存,用于质控试验的平板保存期限为5天,用于常规试验的可略有延长.
一般不用考虑抗生素溶液的杂菌问题,不过如果有条件,可以采用膜过滤的方法过滤除菌,再用于带药平板的配制.
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